瓊脂糖凝膠電泳儀的使用步驟

        瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為載體制備的凝膠。瓊脂糖分為普通瓊脂糖和化學(xué)修飾后熔點(diǎn)較低的低熔點(diǎn)瓊脂糖。瓊脂糖的熔點(diǎn)在 62-65°C 之間。熔化后，在37°C可保持液體數(shù)小時(shí)，在30°C固化。成膠。它主要用于凝膠中染色體DNA的原位消化和DNA片段的回收。由于其孔徑較大，瓊脂糖凝膠常用于分離大分子蛋白質(zhì)和 DNA。
        瓊脂糖是瓊脂分離制備的鏈狀多糖，其結(jié)構(gòu)單元為D-半乳糖和3.6-脫水L半乳糖。許多瓊脂糖鏈在氫鍵和其他力的作用下盤(pán)繞形成繩狀瓊脂糖束，形成大的網(wǎng)狀凝膠。因此，該凝膠適用于免     疫復(fù)合物、核酸和核蛋白的分離、鑒定和純化。在臨床生化試驗(yàn)中，常用于LDH、CK等酶的檢測(cè)。
        瓊脂糖凝膠電泳儀使用步驟：
         1、用蒸餾水清洗制膠工具，準(zhǔn)備制膠板，用瓊脂封住模具邊緣，套上梳子；
         2.根據(jù)分離量根據(jù)樣品量制備適當(dāng)濃度的瓊脂糖凝膠。準(zhǔn)確稱(chēng)取一定量的干瓊脂糖粉，加入適量體積的錐形瓶中，加入一定量的電泳緩沖液，放入微波爐中加熱融化，冷卻片刻；
         3、將融化的瓊脂溶液搖勻，倒入電泳槽中，等待凝固；
         4.室溫固化約30-40分鐘后，小心拔出梳子，將固化的凝膠放入電泳槽中，準(zhǔn)備上樣；
         5、將電泳緩沖液倒入電泳槽中，在凝膠面以下約1mm處，去除凝膠孔中的氣泡；
         6. 加載樣品，在5ul DNA樣品中加入1ul樣品緩沖液和染料，用抓斗混合，加入到凝膠孔內(nèi)；
         7、裝完樣品后，打開(kāi)電源，紅色正極，黑色負(fù)極，DNA樣品負(fù)極移到正極，樣品孔一側(cè)為負(fù)極，電壓40-50v ，電壓約30分鐘；
         8、當(dāng)電壓結(jié)束時(shí)，關(guān)閉電源，觀察凝膠成像儀上的電壓位置，并比較標(biāo)記來(lái)判斷大小。