實驗原理
高壓蒸汽**是將待**的物品放在一個密閉的加壓**鍋內(nèi),通過加熱,使**鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡,然后關(guān)閉排氣閥,繼續(xù)加熱,此時由于蒸汽不能溢出,而增加了**器內(nèi)的壓力,從而使沸點增高,得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到**的目的。
在同一溫度下,濕熱的**效力比干熱大,其原因有三:一是濕熱中***體吸收水分,蛋白質(zhì)較易凝固,因蛋白質(zhì)含水量增加,所需凝固溫度降低(表Ⅵ-2),二是濕熱的穿透力比干熱大;三是濕熱的蒸汽有潛熱存在,每1克水在100℃時,由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)時可放出2.26kJ(千焦)的熱量。這種潛熱,能迅速提高被**物體的溫度,從而增加**效力。
一般培養(yǎng)基用1.05kg /cm2,121.3℃15—30分鐘可達到徹底**的目的。**的溫度及維持的時間隨**物品的性質(zhì)和容量等具體情況而有所改變。例如含糖培養(yǎng)基用0.56kg/cm2(8磅/英寸2),112.6℃**15分鐘,但為了保證效果,可將其他成分先行121.3℃,20分鐘**,然后以無菌操作手續(xù)加入**的糖溶液。又如盛于試管內(nèi)的培養(yǎng)基以1.05kg/cm2,121.3℃**20分鐘即可,而盛于大瓶內(nèi)的培養(yǎng)基*好以1.05kg/cm2**30分鐘。
實驗室中常用的高壓蒸汽**鍋有立式、臥式和手提式等幾種。本實驗介紹手提式高壓蒸汽**鍋的使用方法。
一般培養(yǎng)基用1.05kg /cm2,121.3℃15—30分鐘可達到徹底**的目的。**的溫度及維持的時間隨**物品的性質(zhì)和容量等具體情況而有所改變。例如含糖培養(yǎng)基用0.56kg/cm2(8磅/英寸2),112.6℃**15分鐘,但為了保證效果,可將其他成分先行121.3℃,20分鐘**,然后以無菌操作手續(xù)加入**的糖溶液。又如盛于試管內(nèi)的培養(yǎng)基以1.05kg/cm2,121.3℃**20分鐘即可,而盛于大瓶內(nèi)的培養(yǎng)基*好以1.05kg/cm2**30分鐘。
實驗室中常用的高壓蒸汽**鍋有立式、臥式和手提式等幾種。本實驗介紹手提式高壓蒸汽**鍋的使用方法。
實驗試劑
牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基
實驗設(shè)備
手提式高壓蒸汽菌鍋等
實驗材料
培養(yǎng)皿(6套一包)
實驗步驟
1.首先將內(nèi)層**桶取出,再向外層鍋內(nèi)加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。
2.放回**桶,并裝入待**物品。注意不要裝得太擠,以免防礙蒸汽流通而影響**效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸,以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。
3.加蓋,并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層**桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓,使螺栓松緊一致,勿使漏氣。
4.用電爐或煤氣加熱,并同時打開排氣閥,使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后,關(guān)上排氣閥,讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時,控制熱源,維持壓力至所需時間。本實驗用 1.05kg/cm2,121.3℃,20分鐘**。
5.**所需時間到后,切斷電源或關(guān)閉煤氣,讓**鍋內(nèi)溫度自然下降,當(dāng)壓力表的壓力降至0時,打開排氣閥,旋松螺栓,打開蓋子,取出**物品。如果壓力未降到0時,打開排氣閥,就會因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。
6.將取出的**培養(yǎng)基放入 37℃溫箱培養(yǎng)24小時,經(jīng)檢查若無雜菌生長,即可待用。
注意事項
檢查培養(yǎng)基**是否徹底。