如何調(diào)節(jié) 激光共聚焦顯微鏡 的激光強(qiáng)度:
激光強(qiáng)度有兩個(gè)調(diào)節(jié)因素:電源控制旋鈕(power control knob)、聲光可調(diào)諧濾波器(Acousto-Optical Tunable Filter, AOTF)
1. 電源控制旋鈕:一般設(shè)置成*大值的30%,輸出增大,激光器壽命將縮短,也將產(chǎn)生激光噪音,應(yīng)先調(diào)節(jié)AOTF, PMT等以獲取*佳強(qiáng)度。
2.聲光可調(diào)諧濾波器:控制激發(fā)光光束及強(qiáng)度,可在毫秒級(jí)速度內(nèi)開啟或關(guān)閉激光或調(diào)節(jié)其在0-100%之間進(jìn)行變化。這樣就能對每個(gè)圖像點(diǎn)使用不同的激光光束,并選擇需要的強(qiáng)度。
工作原理:利用了聲波在各項(xiàng)介質(zhì)中傳播時(shí)對入射到傳播介質(zhì)中的布拉格衍射作用。當(dāng)輸入一定頻率的射頻信號(hào)時(shí),AOTF對入射多色光進(jìn)行衍射,從中選出波長為入的單色光,單色光的波長與射頻頻率f有一一對應(yīng)關(guān)系,只要通過電信號(hào)的調(diào)諧即可快速、隨機(jī)改變輸出關(guān)的波長。AOTF 實(shí)現(xiàn)激光強(qiáng)度連續(xù)調(diào)節(jié),并有快速調(diào)節(jié)功能,實(shí)現(xiàn)局部刺激和掃描、快速波長切換(微秒級(jí))在 激光共聚焦顯微鏡 ,光電倍增管并不能增加激光的強(qiáng)度,但能調(diào)節(jié)*后成像的光電的強(qiáng)度,因此通過調(diào)節(jié)光電倍增管的電壓能夠調(diào)節(jié)圖像的亮度。另外,針孔(confocal pinhole)大小影響光子量,也可調(diào)節(jié)圖像的亮度。光電倍增管是一種對紫外光、可見光和近紅外光極其敏感的特殊真空管,能使進(jìn)入的微弱光信號(hào)增強(qiáng)至原本的108倍,使光信號(hào)被測量。