庚型肝炎病毒檢測
庚型肝炎病毒(HGV)呈世界性分布，與人類急性和(或)慢性肝炎有關(guān)。主要以血液途徑傳播，如輸血及血制品、靜脈吸毒、使用污染的注射器、經(jīng)常接觸血源等。HGV為單股正鏈RNA病毒，基因組全長9 392個核苷酸?；蚪Y(jié)構(gòu)分為：5’非編碼區(qū)、編碼區(qū)(結(jié)構(gòu)區(qū)和非結(jié)構(gòu)區(qū))、3’非編碼區(qū)，結(jié)構(gòu)區(qū)編碼核心蛋白和包膜蛋白，非結(jié)構(gòu)區(qū)有NSl、NS2、NS3、NS4、NSs等5個區(qū)，其中NS2編碼蛋白酶。庚型肝炎病毒(HGV)實驗室檢測指標(biāo)主要為HGVAb-IgG。
[測定方法] ELISA法
[方法學(xué)原理] 庚型肝炎病毒(HGV)特異性抗原預(yù)包被于微孔板條上，樣品加入已有樣品稀釋液的反應(yīng)孔中，在隨后的溫育過程中，若樣品中含特異性抗體(HGVAb—IgG)，則該抗體與包被抗原形成抗原—抗體復(fù)合物被吸附到微孔板上，再加入酶標(biāo)記的第2抗體，*終形成抗原—抗體—酶標(biāo)記第2抗體復(fù)合物，洗滌除去未結(jié)合的游離酶，加入顯色劑后顯色。反之，若樣品中不含特異性抗體(HGVAb-IgG)，則加入顯色劑后不顯色。
[標(biāo)本準(zhǔn)備] 靜脈抽血2ml，不抗凝。
[試劑]
1．包被反應(yīng)板
2．樣品稀釋液
3．陰性對照
4．陽性對照
5．洗滌劑
6．酶標(biāo)記第2抗體
7．顯色劑A、B
8．終止液
[儀器設(shè)備] 酶標(biāo)儀或全自動酶聯(lián)**檢測儀。
[測定步驟]
1．用加樣器在微孔反應(yīng)條中加入樣品稀釋液，每孔100ul。
2．將待測標(biāo)本各l0ul分別加人已有樣品稀釋液的各孔中，直接加陰性對照、陽性對照各100u1，設(shè)空白對照1孔。
3．充分混勻，37℃環(huán)境中溫育20min。
4．傾去內(nèi)容物，用洗滌液洗板5次，確保每次吸凈無殘留，全部洗完后在吸水紙上用力拍干。
5．各孔加入酶標(biāo)記第2抗體100fA，振蕩混勻。
6．傾去內(nèi)容物，用洗滌液洗板5次，確保每次吸凈無殘留，全部洗完后在吸水紙上用力拍干。
7．每孔加入顯色劑A、B各1滴，顯色10min。
8．終止顯色后，在酶標(biāo)儀上比色(波長為450nm)，樣品吸光度大于陰性對照2．1倍者為陽性。
[注意事項]
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)置室溫平衡30min后方可使用，未用完的微孔條用自封袋密封保存，溫育酶標(biāo)板的時間和溫度必須嚴(yán)格控制。
2．加液時必須用移液器，并經(jīng)常校對移液器的準(zhǔn)確性。
3．洗滌時各孔均需加滿洗滌液，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。使用洗板機洗滌應(yīng)設(shè)定30～60s浸泡時間。
4．所有樣品和廢棄物都應(yīng)按傳染源處理，終止液為2mol／L的硫酸，使用時必須注意**。
5．操作過程中禁止將預(yù)包被微孔板與其他試劑、次氯酸類**劑接觸。
[正常參考值] HGVAb-IgG陰性
[臨床意義] HGVAb-IgG陽性是對HGV進行診斷的重要依據(jù)。HGVAb-IgG持續(xù)時間較長，具有流行病學(xué)調(diào)查意義。
庚型肝炎病毒(HGV)呈世界性分布，與人類急性和(或)慢性肝炎有關(guān)。主要以血液途徑傳播，如輸血及血制品、靜脈吸毒、使用污染的注射器、經(jīng)常接觸血源等。HGV為單股正鏈RNA病毒，基因組全長9 392個核苷酸?；蚪Y(jié)構(gòu)分為：5’非編碼區(qū)、編碼區(qū)(結(jié)構(gòu)區(qū)和非結(jié)構(gòu)區(qū))、3’非編碼區(qū)，結(jié)構(gòu)區(qū)編碼核心蛋白和包膜蛋白，非結(jié)構(gòu)區(qū)有NSl、NS2、NS3、NS4、NSs等5個區(qū)，其中NS2編碼蛋白酶。庚型肝炎病毒(HGV)實驗室檢測指標(biāo)主要為HGVAb-IgG。
[測定方法] ELISA法
[方法學(xué)原理] 庚型肝炎病毒(HGV)特異性抗原預(yù)包被于微孔板條上，樣品加入已有樣品稀釋液的反應(yīng)孔中，在隨后的溫育過程中，若樣品中含特異性抗體(HGVAb—IgG)，則該抗體與包被抗原形成抗原—抗體復(fù)合物被吸附到微孔板上，再加入酶標(biāo)記的第2抗體，*終形成抗原—抗體—酶標(biāo)記第2抗體復(fù)合物，洗滌除去未結(jié)合的游離酶，加入顯色劑后顯色。反之，若樣品中不含特異性抗體(HGVAb-IgG)，則加入顯色劑后不顯色。
[標(biāo)本準(zhǔn)備] 靜脈抽血2ml，不抗凝。
[試劑]
1．包被反應(yīng)板
2．樣品稀釋液
3．陰性對照
4．陽性對照
5．洗滌劑
6．酶標(biāo)記第2抗體
7．顯色劑A、B
8．終止液
[儀器設(shè)備] 酶標(biāo)儀或全自動酶聯(lián)**檢測儀。
[測定步驟]
1．用加樣器在微孔反應(yīng)條中加入樣品稀釋液，每孔100ul。
2．將待測標(biāo)本各l0ul分別加人已有樣品稀釋液的各孔中，直接加陰性對照、陽性對照各100u1，設(shè)空白對照1孔。
3．充分混勻，37℃環(huán)境中溫育20min。
4．傾去內(nèi)容物，用洗滌液洗板5次，確保每次吸凈無殘留，全部洗完后在吸水紙上用力拍干。
5．各孔加入酶標(biāo)記第2抗體100fA，振蕩混勻。
6．傾去內(nèi)容物，用洗滌液洗板5次，確保每次吸凈無殘留，全部洗完后在吸水紙上用力拍干。
7．每孔加入顯色劑A、B各1滴，顯色10min。
8．終止顯色后，在酶標(biāo)儀上比色(波長為450nm)，樣品吸光度大于陰性對照2．1倍者為陽性。
[注意事項]
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)置室溫平衡30min后方可使用，未用完的微孔條用自封袋密封保存，溫育酶標(biāo)板的時間和溫度必須嚴(yán)格控制。
2．加液時必須用移液器，并經(jīng)常校對移液器的準(zhǔn)確性。
3．洗滌時各孔均需加滿洗滌液，防止孔內(nèi)有游離酶不能洗凈。使用洗板機洗滌應(yīng)設(shè)定30～60s浸泡時間。
4．所有樣品和廢棄物都應(yīng)按傳染源處理，終止液為2mol／L的硫酸，使用時必須注意**。
5．操作過程中禁止將預(yù)包被微孔板與其他試劑、次氯酸類**劑接觸。
[正常參考值] HGVAb-IgG陰性
[臨床意義] HGVAb-IgG陽性是對HGV進行診斷的重要依據(jù)。HGVAb-IgG持續(xù)時間較長，具有流行病學(xué)調(diào)查意義。
公安機關(guān)備案號：
