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熒光定量PCR的應用范圍

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熒光定量 PCR 的應用范圍,具體來說可以分為以下幾個方面:

1)分析點突變和等位基因熒光定量PCR可以進行點突變分析和等位基因分析,用不同的熒光報告基團標記Taqman探針,然后分別與野生型和突變型雜交,如果一種熒光信號明顯強于另一種熒光信號,則表明它是純合子;如果兩種熒光信號都明顯增強,則表明它是雜合子。另外分子信標(Molecular Beacon)就是專門為這種技術(shù)設計的探針。 

2)基因表達的定量分析熒光定量PCR對各種基因的表達進行定量分析,如:同一基因在不同組織中的表達差異、同一基因在不同**處理后的表達差異、轉(zhuǎn)基因食品的檢測。過去*常用的高通量篩選基因表達差異的技術(shù)是cDNA芯片和差異顯示,但這兩種技術(shù)的缺點是只能定性而非完整意義上的定量分析。實時PCR技術(shù)和高通道實時 PCR 儀 的出現(xiàn),無疑為這種檢測提供了極大的方便。

3DNA甲基化檢測熒光定量PCR可以進行DNA甲基化檢測,DNA甲基化同人類的許多**有關,特別是癌癥,Laird報道了一種稱作Methylight的技術(shù),在擴增之前先處理DNA,使得未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不受影響,用特異性的引物和Taqman探針來區(qū)分甲基化和非甲基化的DNA,這種方法不僅方便而且靈敏度更高。 

4)單核苷酸多態(tài)性分析 熒光定量 PCR 可以進行單核苷酸多態(tài)性的分析,檢測單核苷酸多態(tài)性對于研究個體對不同**的易感性或者個體對特定**的不同反應有著重要的意義,因分子信標結(jié)構(gòu)的巧妙性,一旦SNP的序列信息是已知的,采用這種技術(shù)進行高通量的SNP檢測將會變得簡單而準確。

5)定量定性分析傳染性**熒光定量PCR對傳染性**進行定量定性分析,這在我國應用比較廣泛,大家比較熟悉。許多生產(chǎn)臨床PCR試劑的廠商已經(jīng)陸續(xù)推出了一系列的診斷試劑,如:肝炎系列、性病系列、腫瘤系列等等。

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