溶液中帶電粒子(離子)在電場中移動的現(xiàn)象。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達(dá)到分離的技術(shù)稱為電泳技術(shù)。1937 年瑞典學(xué)者A.W.K.蒂塞利烏斯設(shè)計制造了移動界面電泳儀 ,分離了馬血清白蛋白的3種球蛋白,創(chuàng)建了電泳技術(shù)。
在確定的條件下,帶電粒子在單位電場強(qiáng)度作用下,單位時間內(nèi)移動的距離(即遷移率)為常數(shù),是該帶電粒子的物化特征性常數(shù)。不同帶電粒子因所帶電荷不同,或雖所帶電荷相同但荷質(zhì)比不同,在同一電場中電泳,經(jīng)一定時間后,由于移動距離不同而相互分離。分開的距離與外加電場的電壓與電泳時間成正比。
電泳種類:
按分離原理的不同,電泳分為 4類:移動界面電泳、區(qū)帶電泳、等電聚焦電泳和等速電泳。
1、移動界面電泳是將被分離的離子(如陰離子)混合物置于電泳槽的一端(如負(fù)極),在電泳開始前,樣品與載體電解質(zhì)有清晰的界面。電泳開始后,帶電粒子向另一極(正極)移動,泳動速度*快的離子走在*前面,其他離子依電極速度快慢順序排列,形成不同的區(qū)帶。只有**個區(qū)帶的界面是清晰的,達(dá)到完全分離,其中含有電泳速度*快的離子,其他大部分區(qū)帶重疊。
2、區(qū)帶電泳是在一定的支持物上,于均一的載體電解質(zhì)中,將樣品加在中部位置,在電場作用下,樣品中帶正或負(fù)電荷的離子分別向負(fù)或正極以不同速度移動,分離成一個個彼此隔開的區(qū)帶。區(qū)帶電泳按支持物的物理性狀不同,又可分為紙和其他纖維膜電泳、粉末電泳、凝膠電泳與絲線電泳。
3、等電聚焦電泳是將兩性電解質(zhì)加入盛有pH梯度緩沖液的電泳槽中,當(dāng)其處在低于其本身等電點(diǎn)的環(huán)境中則帶正電荷,向負(fù)極移動;若其處在高于其本身等電點(diǎn)的環(huán)境中,則帶負(fù)電向正極移動。當(dāng)泳動到其自身特有的等電點(diǎn)時,其凈電荷為零,泳動速度下降到零,具有不同等電點(diǎn)的物質(zhì)*后聚焦在各自等電點(diǎn)位置,形成一個個清晰的區(qū)帶,分辨率極高。
4、等速電泳是在樣品中加有**離子(其遷移率比所有被分離離子的大)和終末離子(其遷移率比所有被分離離子的小),樣品加在**離子和終末離子之間,在外電場作用下,各離子進(jìn)行移動,經(jīng)過一段時間電泳后,達(dá)到完全分離。被分離的各離子的區(qū)帶按遷移率大小依序排列在**離子與終末離子的區(qū)帶之間。由于沒有加入適當(dāng)?shù)闹С蛛娊赓|(zhì)來載帶電流,所得到的區(qū)帶是相互連接的,且因“自身校正”效應(yīng),界面是清晰的,這是與區(qū)帶電泳不同之處。